91尤物手机在线观看|欧美日韩国产在线观看网站|激情五月婷婷中文|伊人一区在线观看

品系背景∶C57BL/6N

品系構(gòu)建策略∶

在小鼠PD-1基因位點敲入人源PD-1胞外域序列，保留小鼠跨膜域和胞內(nèi)域，構(gòu)建嵌合型PD-1人源化小鼠模型。

品系說明∶

hPD-1在小鼠體內(nèi)具有正常的生理表達和調(diào)節(jié)模式。

PD-1胞外域人源化，利于hPD-1靶向藥物的識別。

保留小鼠PD-1胞內(nèi)域，保證正常的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導。

小鼠靶基因不表達，避免交叉反應。

小鼠的免疫系統(tǒng)功能健全。

研究應用∶

本模型可用于評估hPD-1靶向藥物在免疫健全小鼠體內(nèi)的有效性及安全性∶

與人源化腫瘤細胞系聯(lián)用

例如∶與MC38-hPD-L1腫瘤細胞系聯(lián)用，構(gòu)建同源腫瘤模型，以測試靶向hPD-1和hPD-L1 的聯(lián)合療法的療效。

與其他免疫檢查點人源化小鼠雜交

例如∶與hVISTA小鼠雜交，在得到的雙人源化的hPD-1/hVISTA小鼠模型中評估靶向hPD-1 和/或hVISTA的兩種藥物。

模型驗證∶

PD-1表達檢測

圖1.hPD-1在hPD-1小鼠中的表達模式與mPD-1在野生型小鼠中的表達模式一致。

?

hPD-1和mPD-1在經(jīng)αCD3/αCD28抗體活化的hPD-1小鼠和野生型小鼠脾細胞中的表達情況∶（A）Treg亞群、CD4+亞群（CD3+CD4+Foxp3-）和（B）CD8+T（CD3+CD8+）亞群。

?

圖2. hPD-1在hPD-1小鼠的腫瘤浸潤淋巴細胞中的表達。

?

從接種了MC38腫瘤細胞30天的野生型小鼠和hPD-1小鼠中分離腫瘤浸潤淋巴細胞（TILs）。hPD-1小鼠在CD4+ T細胞和CD8+ T細胞上表達hPD-1蛋白，野生型小鼠在CD4* T細胞和CD8+ T細胞上表達mPD-1蛋白。

?

PD-1功能檢測

圖3.T細胞活化（IL-2的產(chǎn)生和擴增）在野生型小鼠和PD-1人源化小鼠之間沒有差別。

?

A.采用ELISA法測定野生型小鼠和PD-1人源化小鼠αCD3/αCD28活化脾細胞的上清液中IL-2 的產(chǎn)生情況，兩者沒有差別。

B.αCD3激活的脾細胞和淋巴結(jié)（LN）中的 CD4+T細胞亞群（CD4+ CD25-），CFSE標記顯示在兩種小鼠之間的活化CD4+T細胞亞群的數(shù)量沒有明顯差別。

?

體內(nèi)藥效實驗

圖4.人源化PD-1小鼠體內(nèi)觀察到hPD-1單抗的抗腫瘤活性。

?

A）hPD-1小鼠接種MC38小鼠結(jié)直腸癌細胞28天后，分別用A、B、C三種αhPD-1單抗以及同型對照處理后的腫瘤體積。

B)? 野生型和hPD-1小鼠顱內(nèi)接種GL261小鼠膠質(zhì)瘤細胞后，用αhPD-1抗體或amPD-1抗體處理。αhPD-1抗體處理能夠顯著提高hPD-1小鼠的生存率。