Foreword 自噬是一種細(xì)胞內(nèi)部的機(jī)制,通過將細(xì)胞內(nèi)成分包裹起來并運(yùn)輸?shù)饺苊阁w進(jìn)行降解,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的自我調(diào)節(jié)和清除有害物質(zhì)。1963年,Christian de Duve首次提出了自噬的概念。1990年,Yoshinori Ohsumi通過釀酒酵母實(shí)驗直觀展現(xiàn)了自噬現(xiàn)象,并揭示了酵母和人的細(xì)胞中的自噬機(jī)制。2003年,自噬關(guān)鍵基因被命名為ATG基因,相關(guān)研究逐漸增加。2016年,Yoshinori Ohsumi獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)或生理學(xué)獎,自噬研究進(jìn)一步受到關(guān)注,成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、植物學(xué)和微生物學(xué)的熱門研究領(lǐng)域。自噬的發(fā)現(xiàn)對于細(xì)胞調(diào)節(jié)和藥物開發(fā)具有重
2012年,哥倫比亞大學(xué)Brent R. Stockwell團(tuán)隊首次提出了一種名為鐵死亡的新型細(xì)胞程序性死亡方式。從此,鐵死亡相關(guān)研究熱潮逐年攀升。這期小編將帶領(lǐng)大家探究鐵死亡調(diào)控與肝纖維化的作用機(jī)制。 與細(xì)胞凋亡和細(xì)胞自噬不同,鐵死亡是一種依賴鐵的過程。鐵死亡的本質(zhì)是谷胱甘肽(GSH)的耗竭和谷胱甘肽過氧化物酶4(GPX4)活性的降低。當(dāng)谷胱甘肽過氧化物無法被GPX4催化還原,脂質(zhì)過氧化物將無法代謝,從而破壞細(xì)胞膜的完整性,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。鐵死亡在形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和遺傳學(xué)上有其獨(dú)特的表征。 ● 形態(tài)特征 表現(xiàn)為線粒體體積縮
細(xì)胞焦亡(pyroptosis)是一種新的程序性細(xì)胞死亡方式,其依賴于Gasdermin家族蛋白形成質(zhì)膜膜孔的、可調(diào)控的細(xì)胞死亡,經(jīng)常但并不總因炎癥性Caspase的活化而完成。其形態(tài)學(xué)特征在電鏡下觀察,可清楚看到在細(xì)胞質(zhì)膜破裂前,焦亡的細(xì)胞形成大量小泡,即焦亡小體。之后細(xì)胞膜上會形成孔隙,細(xì)胞膜破裂,內(nèi)容物流出。 細(xì)胞形態(tài)學(xué):根據(jù)細(xì)胞形態(tài)變,可初步鑒定細(xì)胞是否發(fā)生焦亡。通過光學(xué)顯微鏡觀察,可看到胞漿破裂或有大量細(xì)胞碎片的存在。 LDH釋放檢測:乳酸脫氫酶(LDH)是存在于幾乎所有細(xì)胞內(nèi)的一種酶,當(dāng)細(xì)胞膜破裂時,LDH能被釋放到培
乳腺癌的發(fā)病率逐年增高,并成為中國女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤,是人們常說的“紅顏殺手”。其中,三陰性乳腺癌惡性程度較高,患者生存預(yù)后較差,易出現(xiàn)早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,且既往缺乏有效的針對性治療策略,素有最“毒”乳腺癌之稱。近日,復(fù)旦大學(xué)腫瘤醫(yī)院邵志敏教授、江一舟教授課題組攜手復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院教育部/衛(wèi)健委/醫(yī)科院醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗室趙超課題組,發(fā)現(xiàn)微生物代謝產(chǎn)物氧化三甲胺(TMAO)可以激活抗腫瘤免疫,提高三陰性乳腺癌免疫治療療效。這意味著微生物代謝產(chǎn)物TMAO有望成為三陰性乳腺癌臨床免疫治療的新策略,助推免疫治療。該項重要研究成果已在北京時間3月12日凌晨在國際權(quán)威期刊Cell Metabol
常見小鼠采血方法 小鼠是科研實(shí)驗中常用的實(shí)驗動物,但由于其體積小,血管細(xì),采血難度大,進(jìn)而影響采血的質(zhì)量。 ELK簡要總結(jié)了常見的小鼠采血方法,僅供參考: 一只成年小鼠的循環(huán)血量大約是1.5~2.5ml,大約體重的 6~8%。在對營養(yǎng)狀況良好的小鼠進(jìn)行采血時,單次采血量最多可以到達(dá)循環(huán)血量的10%,(例:若20克小鼠,它的總血量約占1.2-1.4毫升,即每次取120ul-140ul血液不會對小鼠有太大的影響)。采血之后應(yīng)該給予溫?zé)岬牡葷B溶液補(bǔ)充,可以在2~3個星期內(nèi)恢復(fù)原有的水平。兩周采血量小于血液循環(huán)的10%,單周小于7.5%,小鼠血液循環(huán)7
? 組織勻漿定義:將分化的細(xì)胞群用物理機(jī)械手段或其它方法,使細(xì)胞破碎,細(xì)胞內(nèi)容物釋放,與細(xì)胞碎片形成的固液混合形式的濃稠液體。 一、取適量組織塊,用預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.4)沖洗,去除表面殘留的血液與雜質(zhì)。(很多用戶疑惑,這個適量,到底是多少?ELISA試劑盒檢測中:血清或細(xì)胞上清樣本用量100μL/指標(biāo)(單孔);組織用量15mg/指標(biāo)(單孔),差不多干枯綠豆大小。?)具體老鼠各器官大小可見下圖。 二、將組織塊稱重,再剪切成盡可能的小碎塊,以便充分勻漿; 三、可同時選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作,可以簡單地回答樣本中有多少蛋白質(zhì)/多肽/抗體這一基本問題,是科研中比較常用的一種檢測方法。而這種簡單的分析方法的核心,就是標(biāo)準(zhǔn)曲線。沒有它,我們的實(shí)驗就變成了一個二元的“是/不是”測試。有了它,我們可以深入研究生物反應(yīng)的細(xì)節(jié)。那么,是什么使得標(biāo)準(zhǔn)曲線如此強(qiáng)大呢?讓我們在ELISA的背景來討論這個問題。 簡單地說,標(biāo)準(zhǔn)品就是一系列已知目標(biāo)蛋白數(shù)量的陽性對照。例如,如果對人類IgG進(jìn)行ELISA檢測,標(biāo)準(zhǔn)曲線將包含逐漸減少的已知量的人類IgG,它會讓你立刻得出一系列的結(jié)論。 1.我的EL
NF-kB(核因子激活的B細(xì)胞的k-輕槌增強(qiáng))在細(xì)胞因子誘導(dǎo)的基因表達(dá)中起關(guān)鍵性的調(diào)控作用,它調(diào)控的基因編碼:急性期反應(yīng)蛋白、細(xì)胞因子、細(xì)胞粘附分子、免疫調(diào)節(jié)分子、病毒癌基因、生長因子、轉(zhuǎn)錄和生長調(diào)控因子等。通過調(diào)控多種基因的表達(dá),NF-kB參與免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等多種生物進(jìn)程。 NF-kB家族有由cRel, RelA (p65) , RelB, NF-kB1 (p50)、NF-kB2 (p52)組成,它們在N端都具有Rel同源結(jié)構(gòu)域,其中cReI, ReIA (p65)和ReIB存在轉(zhuǎn)錄激活區(qū)(TAD),可正向調(diào)節(jié)基因表達(dá);p52和p50分別由前體蛋白p100、
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